【1.6.7.1】BIACORE SPR(表面等离子体共振检测技术)

一、SPR 介绍

采用表面等离子共振技术,英文简写SPR,是从20世纪90年代发展起来的一种新技术,其应用SPR原理检测生物传感芯片(biosensor chip)上配体与分析物之间的相互作用情况,该方法能够测量配体与分析物的动力学参数Kon:结合速率常数和Koff: 解离速率常数。如下图所示,某抗体及其突变体相对于某抗原在不同pH进行结合和解离的动力学检测结果3。动力学检测的图形。曲线先呈上升趋势,这个是结合曲线;然后为下降趋势,为解离曲线。结合曲线的斜率反应了抗体和抗原的反应速度,在相同的上样浓度下,也说明结合速率常数越大;解离曲线的斜率反应了抗体和抗原的反应生成抗体-抗原复合物的速度,在相同的上样浓度下,斜率越抖也说明结合速率常数越大;解离曲线的斜率反应了抗体-抗原复合物解离形成抗体和抗原的速度,在相同的抗体-抗原复合物浓度下,斜率越平缓说明解离速率常数越小,根据公式结合速率常数越大,解离速率常数越小,抗体相对于抗原的亲和力越强。类似的技术还有生物膜干涉技术测定方法(BLI)

1.3 SPR简介

SPR: 通过分子吸附在重金属膜上引起介电常数及折射率的变化来检测分子作用。

相应信号与质量成线性

BIACORE经典图谱

kinetics model

BIACORE应用场景

四、讨论

参考资料

个人公众号,比较懒,很少更新,可以在上面提问题,如果回复不及时,可发邮件给我: tiehan@sina.cn

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