【1.2.1】OD600

OD值是optical density(光密度)的缩写,光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量存在定量关系。我们可以用这种定量关系测定被测物浓度。

OD600是将波长设定为 600nm 时测定的光密度值,是追踪液体培养物中微生物密度的标准指标,通常用来指示菌体细胞密度。

其测定方法:

  1. 第一步在仪器光度计模式中,先把波长走到600nm;
  2. 第二步放入未加菌液的培养液作为空白样品,调零;
  3. 第三步放入样品显示样品的T值(透过率值),之后带入OD值与T值的换算公式中可以得到OD600。

其测定和解读有两点需要注意:

  1. 要测量的样品必须是均一的溶液,不能有沉淀,如果有沉淀的话就要摇匀。
  2. OD600只是一个相对数值,要想获得具体密度,需要先用血球计数板或流度式细胞仪测出菌悬液单位体积内的菌数,然后制作标准曲线。一般来说,吸光度值在0.1-1.5之间(最好使OD600在0.2-0.8之间)可以保证仪器的准度和测量结果的线性关系,对于浓度过度的样品应稀释后再测定。

参考资料

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