【4.7.3】双分子荧光互补技术(BiFC)

双分子荧光互补技术本质上是一种蛋白质片段互补技术,是指将荧光蛋白多肽链切开并形成不发荧光的 N-和 C-末端2个多肽片段。当目标蛋白质相互作用时,2个片段重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子,即可产生荧光。

优点:

① 灵敏度高,直观可视;

② 可以对在动物、植物和细菌等不同的宿主细胞中蛋白进行定位和互作强度分析;

③ YFP,RFP等荧光标记选择多样。

缺点:

① 对温度条件要求较高,温度越低,越有利于片段之间的互补;

② 有时2个不发光的荧光片段会发生自发融合的情况,出现假阳性的结果。

参考资料

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