【4.3.1】蛋白质和核酸的紫外吸收(uv)

Trp、Tyr和Phe三种芳香族氨基酸的R基团在280nm波长附近有最大的紫外吸收,绝大多数蛋白质都含有它们,因而也会有紫外吸收现象。核酸因为含有碱基,所以也有紫外吸收,但最大吸收峰在260nm。因此,测定280nm和260nm的光吸收,已成为分别对蛋白质和核酸进行定性和定量分析最简捷的方法。

  1. 蛋白质的紫外吸收与三种芳香族氨基酸有关,最大吸收峰为280nm(Proteins absorb UV light due to three aromatic amino acids and the absorbance peak is at 280nm)
  2. RNA和DNA的紫外吸收与碱基有关,最大吸收峰为260nm(Nucleic acids absorb UV light due to the aromatic bases and the absorbance peak is at 260nm)
  3. 提供一种对蛋白质和核酸进行定性、定量和纯度分析最简便的方法(Provides a very convenient way to determine quality and quantity of both proteins and nucleic acids)
    • 1.0 OD = DNA concentration of 50 mg/ml (double stranded DNA) ;38 mg/ml (single-stranded DNA or RNA);
    • A260/A280 : dsDNA–1.8;pure RNA–2.0; protein–0.5

参考资料

  • 南京大学 杨荣武老师 《结构生物学》课件
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