【6.3.1】CHO(中国仓鼠卵巢)细胞

CHO-K1

有许多类型的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞正在使用。当CHO细胞起源时,这还是个谜,但人们认为这条线是1960年代衍生的。西奥多·帕克(Theodore Puck)博士从波士顿癌症研究基金会(Boston Cancer Research Foundation)的实验室接受了一只雌性中国仓鼠,并用该动物获得了原始细胞系。从第一批CHO品系中获得一条品系CHO-K1。 CHO-K1是一种粘附系(adherent line),传统上由补充了10%FBS的F12培养基种植。人们认为CHO系很重要,因为它们的哺乳动物细胞染色体很少,并用于放射细胞遗传学,并且易于培养而闻名。 CHO-K1细胞也不表达EGFR。

CHO-DG44

通过几轮诱变删除了dhfr基因的两个拷贝,CHO-DG44细胞从原始CHO-K1细胞衍生而来。从头合成嘌呤,胸苷酸和某些氨基酸需要二氢叶酸还原酶(dhfr),并且是CHO细胞生长和增殖所必需的。结果,CHO-DG44细胞需要甘氨酸,次黄嘌呤和胸苷(GHT)才能生长。该要求允许通过转染含有目的基因和替代dhfr基因的重组DNA质粒来选择重组克隆,如果细胞在GHT减培养基上生长,那么它们已经吸收了重组质粒DNA,希望也吸收了目的基因。

参考资料

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