【4.3.1】蛋白质和核酸的紫外吸收(uv)
Trp、Tyr和Phe三种芳香族氨基酸的R基团在280nm波长附近有最大的紫外吸收,绝大多数蛋白质都含有它们,因而也会有紫外吸收现象。核酸因为含有碱基,所以也有紫外吸收,但最大吸收峰在260nm。因此,测定280nm和260nm的光吸收,已成为分别对蛋白质和核酸进行定性和定量分析最简捷的方法。
- 蛋白质的紫外吸收与三种芳香族氨基酸有关,最大吸收峰为280nm(Proteins absorb UV light due to three aromatic amino acids and the absorbance peak is at 280nm)
- RNA和DNA的紫外吸收与碱基有关,最大吸收峰为260nm(Nucleic acids absorb UV light due to the aromatic bases and the absorbance peak is at 260nm)
- 提供一种对蛋白质和核酸进行定性、定量和纯度分析最简便的方法(Provides a very convenient way to determine quality and quantity of both proteins and nucleic acids)
- 1.0 OD = DNA concentration of 50 mg/ml (double stranded DNA) ;38 mg/ml (single-stranded DNA or RNA);
- A260/A280 : dsDNA–1.8;pure RNA–2.0; protein–0.5
参考资料
- 南京大学 杨荣武老师 《结构生物学》课件
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