【2.5】mRNA 编码细胞因子

三、方法

• 免疫组织化学和流式细胞术终点分析采用n = 5，荧光素酶生物分布n采用3 至 4。
• 基于肿瘤体积、体重减轻和健康状况的终点标准在研究开始前确定，并由未直接参与研究的核心机构工作人员以非盲法监测
• 通过生物成像评估 mRNA 编码蛋白的生物分布，并通过中尺度发现 (MSD) 或单分子阵列技术 (Simoa) 评估肿瘤内表达
• 使用流式细胞术、免疫组织化学和 RNA 测序确定了肿瘤内细胞因子 mRNA 治疗的免疫调节作用，并使用抗体介导的免疫细胞耗竭和敲除肿瘤模型研究进一步研究了作用机制。

统计分析：

• 除非另有说明，否则使用 GraphPad Prism (GraphPad Software) 进行统计分析。
• 低于 0.05的P值被认为是显着的，除了生存曲线比较，其中P手动校正值阈值以进行多重比较。
• 纵向数据通过双向 ANOVA 或混合效应分析在适当的情况下进行分析，称为双向 ANOVA 类型。
• 在比较三个或更多组的情况下，根据成对比较的数量进行 Tukey 或 Dunnett 后检验。
• 当分别比较两组和三组或更多组时，通过不成对的、两侧的 Mann-Whitney 检验和 Kruskal-Wallis 检验分析一维数据。
• 使用 Gehan-Breslow-Wilcoxon 检验通过成对曲线比较分析存活数据，然后手动调整Bonferroni P值以校正多重比较。
• 除非另有说明，n 是生物学重复（个体小鼠、器官或人类供体 PBMC 样本）的数量。

参考资料

• Local delivery of mRNA-encoding cytokines promotes antitumor immunity and tumor eradication across multiple preclinical tumor models。 https://www.science.org/doi/10.1126/scitranslmed.abc7804