【2.3】RNA专利解读(CureVac)
经过三年的研究，基于 mRNA 的疫苗已证明其安全性和有效性。他们终于进入了市场，并承诺彻底改变该领域。2020 年 12 月，FDA 和 EMA 授予了美国和欧洲首个 mRNA 疫苗的历史性授权。在大规模试验中，针对 COVID-19 的 mRNA 疫苗的有效率分别为 94%（mRNA-1273 Moderna）和 95%（BNT162b2 BioNTech）。
其他开发 COVID-19 mRNA 疫苗的公司也可能很快获得上市许可，例如 CureVac (CVnCoV)、Arcturus (ARCT-021)、伦敦帝国理工学院 (LNP-nCoVsaRNA)、朱拉隆功大学 (ChulaCov19) 和 HDT Bio/Gennova (HDT) -301/HGCO19）。在这种不断发展的背景下，了解这些不同参与者的知识产权 (IP) 地位和战略至关重要。 基于RNA 疫苗专利格局Knowmade 于 2021 年 1 月发布的报告显示，CureVac、BioNTech 和 Moderna 成为 mRNA 疫苗领域的顶级参与者。不过，尽管 CureVac 的 COVID-19 RNA 疫苗候选药物尚未获得授权，但该公司是该领域的先驱，拥有最大的专利组合。其确定的第一个专利家族于 2001 年发布，其专利组合包括 100 多个专利家族。此外，其专利组合包括数量最多的“活”专利（370 项已授权专利和 400 项待批专利），地理覆盖范围广泛，使 CureVac 成为 mRNA 疫苗领域最强的知识产权地位。其专利组合也是竞争对手（包括 BioNTech 和 Moderna）主要针对的专利组合，在欧洲专利局 (EPO) 面前有 10 多项未决异议。这些受到挑战的专利可能会阻碍竞争对手的自由经营。例如，这些受攻击的专利披露了：
- 优化的mRNA（化学修饰：EP1797886；修饰的5’帽结构：EP1685844；优化的G/C含量：EP1392341、EP2680881、EP2680880）；
- mRNA 注射剂（EP3153179）；
- 编码传染病和癌症疫苗抗体的 mRNA 序列（EP2101823）；
- 癌症疫苗：（编码检查点调节剂 PD-1 通路抑制剂（EP3292873、EP2958588、EP3173092、EP3326641）或肿瘤坏死因子受体 OX40（EP3116535）的mRNA。
CureVac 最近披露，其 COVID-19 候选疫苗 (CVnCoV) 使用未修饰的 mRNA，可改善人体病毒防御的诱导，包括 1 型干扰素。 根据初步结果，其候选疫苗在室温下表现出长达 24 小时的稳定性和在 2-8°C 下至少保存 3 个月。因此，CureVac 的 mRNA 技术应用于其候选疫苗，使其能够胜过其主要竞争对手的稳定性，即 Moderna（在 -20°C 下稳定）和 BioNTech（在 -70°C 下稳定）。此外，EMA 已授权 Moderna 和 BioNTech 提供 100 µg 和 30 µg 剂量的疫苗，而 CVnCoV 的临床前数据支持低剂量（12 µg）的保护效力。考虑到其强大的 IP 地位、低剂量的稳定性和有效性数据，CVnCoV 因此可能比其竞争对手具有强大的优势。
导致这些稳定性和功效差异的确切技术并未公开。专注于 CureVac 的 mRNA 技术，以下是在RNA 疫苗专利领域中确定的一些专利，公开了增强 mRNA 稳定性和翻译效率的技术：
- 优化的 5’cap ( WO2019/175356 )，
- 5’UTR ( WO2013/143699 , WO2013/143700) ),
- G/C 含量 ( EP1604688 ),
- 聚 (A) 尾 ( WO201691391 ) 和
- 5' 和/或 3' UTR ( WO2016/107877 , WO2017/036580 )
例如，WO2019/175356公开了优化的 5' 帽，其已被证明可保持高蛋白表达水平至少 72 小时。如下图所示，cap l的存在，例如，WO2019/175356公开了优化的5’caps，其已被证明可以保持高蛋白表达水平至少72小时。如下图所示，与具有 cap O 结构的 RNA 相比，RNA 中 cap 1 结构的存在导致 mEPO 的表达水平高得多，尤其是在注射后 24 小时。
用具有 capO 结构 (A) 或 capl 结构 (B) 的不同 5'-帽类似物修饰的鼠促红细胞生成素 (mEPO) RNA 的体内翻译。ARCA G：用 ARCA G 共转录加帽的 RNA；Dl：用β-S-ARCA的Dl非对映异构体共转录加帽的RNA；EcapO：RNA 酶促加帽，提供 capO 结构；ARCA G+Ecapl：RNA 用 ARCA G 共转录加帽，然后使用提供 capl 结构的牛痘加帽酶和牛痘甲基转移酶进行酶加帽；Dl+Ecapl：用β-S-ARCA的Dl非对映异构体共转录加帽的RNA，然后使用提供capl结构的牛痘加帽酶和牛痘甲基转移酶酶促加帽；Ecapl：酶促加帽的RNA，提供capl结构。
递送系统是另一种稳定和保护 RNA 分子的重要化合物。然而，观察到的差异不太可能与输送系统有关，因为 CureVac 和 BioNTech 都依赖 Acuitas 的脂质纳米颗粒 (LNP) 技术。 其 LNP 递送系统的专利情况尚不清楚，并且与 BioNTech 一样，CureVac 可能必须从日内瓦获得许可才能使用 Arbutus Biopharma 的关键 LNP 技术（例如US8058069）。事实上，在 2017 年的诉讼和解之后，Acuitas 将 Arbutus LNP 技术再许可的权利（例如US8058069) 向任何第三方终止。然后在 2018 年，Arbutus 和 Roivant 成立了 Genavent Sciences，这是一家共同拥有的公司，专注于发现、开发和商业化由 Arbutus 专有的 LNP 支持的广泛的基于 RNA 的疗法。
除了 COVID-19 疫苗之外，RNA 技术有望开发出能够有效触发针对癌症和具有挑战性的病毒（例如 HIV-1、单纯疱疹病毒、呼吸道合胞病毒）的免疫反应的疫苗。与传统疫苗相反，mRNA 疫苗在癌症治疗方面显示出有希望的结果，可触发抗原特异性 T 细胞反应。该技术还允许个性化免疫疗法或癌症新抗原疫苗，通过匹配每个人癌症的遗传特征并诱导针对肿瘤突变部分的免疫反应。
CureVac 的产品线包括传染病疫苗和癌症免疫疗法，这些疫苗可能至少部分被以下专利家族覆盖：WO2015 / 024665），拉沙（ WO2018 / 115525， WO2020 / 002525），黄热病（ WO2019 / 193183， WO2019 / 115635），Respirational合胞病毒（ WO2015 / 024668， WO2019 / 202035），轮状病毒（ WO2020 / 254535， WO2017 / 081110）、疟疾（ WO2020/128031）、流行性流感（ WO2017/191258、 WO2019/092153）、皮肤黑色素瘤/腺样囊性癌/皮肤/头颈部鳞状细胞癌（CV8102； WO332018/003非小细胞肺癌）癌症（BI1361849/CV9202； WO2009/046738与勃林格共同提交；WO2015/024666 )。
多年来，CureVac 参与了许多不同项目的开发合作。在癌症免疫治疗领域，CureVac 自 2013 年开始与路德维希癌症研究所合作。 2014 年 8 月，CureVac 获得了 CureVac 研究性治疗性 mRNA 肺癌疫苗 BI1361849 以及包含该疫苗的产品的开发和商业化的独家许可，对于与人类癌症有关的所有用途，勃林格殷格翰。共同申请的同族专利， WO2018/167320, 被确定，声称一种编码 PD-1 和 LAG-3 通路抑制剂的 mRNA 疫苗用于治疗癌症，包括肺癌。结果表明，RNA 疫苗接种与抗 PD-1 和抗 LAG-3 治疗相结合可降低 E.G7-OVA 肿瘤模型中的肿瘤生长（下图）。
C57BL 6 小鼠（每组 n > 9）在右侧皮下用 3 x 105 个同基因 E.G7-OVA 淋巴瘤细胞（表达卵清蛋白的 EL4 淋巴瘤细胞系）进行攻击。肿瘤细胞接种后四天，小鼠用 OVA 编码 RNA（“RNActive”）皮内接种，并用 200 pg 抗 PD-1（BioXcell）和 200 pg 抗 LAG-3 抗体（BioXcell）腹膜内治疗，每周两次三到四个星期。用非特异性 RNA 疫苗处理的小鼠作为对照。
2011 年，CureVac 与赛诺菲巴斯德就几种预先定义的病原体达成了合作和许可选择协议。CureVac 随后在 2014 年签署了一项独家许可协议，以开发和商业化一种针对未公开病原体的基于 mRNA 的疫苗。作为合作的一部分，确定了两个针对寨卡病毒和黄病毒疫苗联合提交的专利族（WO2017/140905和WO2019/115635）。WO2017/140905 的结果表明，在仓鼠中接种经过测试的 ZIKV mRNA 疫苗会触发浓度依赖性免疫反应。
注射的 ZIKV prME mRNA 疫苗在接种的仓鼠中诱导了针对 E 蛋白的结合抗体。第三次接种后，两种浓度的 IgG 抗体滴度均稳定且高，表明在仓鼠中接种经测试的 ZIKV mRNA 疫苗引发了浓度依赖性免疫反应。
2015 年，比尔和梅琳达·盖茨基金会投资了 CureVac，以支持开发和生产多种疫苗，以应对对世界上最贫穷国家的人们造成不成比例影响的传染病（例如轮状病毒、疟疾、流行性流感）。2017 年，CureVac 与礼来 (Eli Lilly) 签订了许可协议，以开发和商业化多达五种潜在的癌症疫苗产品。然而，2020 年 6 月，礼来公司宣布提前终止协议。2018 年，CureVac 与 Arcturus 合作以使用其脂质介导的递送系统 LUNAR ™，以开发 mRNA 产品候选者，主要针对鸟氨酸转氨甲酰酶 (OTC) 缺乏症。2020 年 7 月，GSK 和 CureVac 合作开发多达五种基于 mRNA 的传染病疫苗和针对传染病病原体（不包括 COVID-19）的单克隆抗体。2019 年 2 月，流行病防范创新联盟 (CEPI) 投资了 CureVac，以支持和加速开发针对 COVID-19、拉沙热和黄热病等新兴传染病的疫苗。2021 年 1 月，CureVac 与拜耳达成协议，以加快其 COVID-19候选疫苗的开发和供应。拉沙热和黄热病。2021 年 1 月，CureVac 与拜耳达成协议，以加快其 COVID-19候选疫苗的开发和供应。拉沙热和黄热病。2021 年 1 月，CureVac 与拜耳达成协议，以加快其 COVID-19候选疫苗的开发和供应。 除了开发 Covid 疫苗外，这些不同的合作因此强调了 CureVac 在许多不同的 RNA 疫苗项目中的存在，展示了该公司多年来开发的强大专业知识。
总之，大流行加速了最终成功进入市场的 RNA 技术的出现。来自 COVID-19 疫苗销售和产能扩张的可观现金流应该会通过更快地提供新的传染病和癌症疫苗而使数百万人受益。在知识产权方面，随着产品进入这个充满希望的市场，大流行之后可能会出现一些侵权行为。在这种情况下，CureVac 应利用其领先的知识产权地位，通过许可和侵权诉讼向竞争对手主张其专利。鉴于 RNA 疫苗关注的潜在市场及其相对于其他技术的优势，这些行动产生的收入可能非常可观。
参考资料
